紫杉醇对根尖周炎破骨细胞增殖及分化的影响

doi:10.3969/j.issn.2095-4344.1101

中国组织工程研究 ›› 2019, Vol. 23 ›› Issue (11): 1647-1651.doi: 10.3969/j.issn.2095-4344.1101

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紫杉醇对根尖周炎破骨细胞增殖及分化的影响

吴慧1，姜龙2，李晓杰3，季秋实2，许诺2

(1海南医学院第一附属医院口腔科，海南省海口市 570102；2大连医科大学中山学院，辽宁省大连市 116000；3大连医科大学口腔医学院，辽宁省大连市 116044)

收稿日期:2018-11-05 出版日期:2019-04-18 发布日期:2019-04-18
通讯作者: 许诺，硕士，讲师，大连医科大学中山学院，辽宁省大连市 116000
作者简介:吴慧，女，1985年生，海南省海口市人，汉族，2011年大连医科大学毕业，硕士，主治医师，主要从事口腔医学的研究。
基金资助:
辽宁省科学技术计划项目面上项目(201600752)，项目负责人：李晓杰

Effect of paclitaxel on proliferation and differentiation of osteoclasts in periapical periodontitis

Wu Hui1, Jiang Long2, Li Xiaojie3, Ji Qiushi2, Xu Nuo2

(1Department of Stomatology, the First Affiliated Hospital of Hainan Medical University, Haikou 570102, Hainan Province, China; 2Zhongshan College of Dalian Medical University, Dalian 116000, Liaoning Province, China; 3Stomatology College of Dalian Medical University, Dalian 116044, Liaoning Province, China)

Received:2018-11-05 Online:2019-04-18 Published:2019-04-18
Contact: Xu Nuo, Master, Lecturer, Zhongshan College of Dalian Medical University, Dalian 116000, Liaoning Province, China
About author:Wu Hui, Master, Attending physician, Department of Stomatology, the First Affiliated Hospital of Hainan Medical University, Haikou 570102, Hainan Province, China
Supported by:
the Scientific and Technological Program of Liaoning Province (General Program), No. 201600752 (to LXJ)

摘要/Abstract

摘要：

文章快速阅读：

文题释义：
紫杉醇：主要是由红豆杉科植物中提取的一类产物。大量的研究表明紫杉醇广泛应用于恶性肿瘤的治疗。但是国内外对于紫杉醇治疗根尖周炎骨破坏的研究较少。
破骨细胞：为多核细胞，由于破骨细胞本身生存周期较短，目前对于破骨细胞的培养主要采用破骨前体细胞，在体外对其进行诱导后形成成熟的破骨细胞。

摘要
背景：研究表明紫杉醇可以治疗骨转移肿瘤，说明紫杉醇对于治疗骨破坏疾病有一定的疗效，但是目前国内外对于紫杉醇治疗骨破坏相关疾病的研究很少，关于紫杉醇调节破骨细胞形成和功能的机制仍然不明确。
目的：观察紫杉醇对根尖周炎破骨细胞增殖及分化的影响。
方法：体外培养RAW264.7细胞24 h后换RANKL诱导液培养，通过Real-time PCR及抗酒石酸酸性磷酸酶鉴定破骨细胞诱导成功。CCK8检测不同浓度(1，10-1，10-2，10-3，10-4, 10-5，10-6 mol/L)的紫杉醇作用后破骨细胞增殖情况，筛选紫杉醇作用于破骨细胞最佳浓度；以未加入紫杉醇的破骨细胞为对照组；采用Real time-PCR和Western blot检测紫杉醇对破骨细胞凋亡的影响。
结果与结论：①紫杉醇10-4 mol/L时，破骨细胞增殖能力开始降低(P < 0.05)，表明10-4 mol/L紫杉醇为作用于RAW264.7细胞的最佳浓度；②加入10-4 mol/L紫杉醇0，24和48 h，破骨细胞增殖均显著低于未加入紫杉醇对照组(P < 0.05)；破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶A值的增殖均显著低于未加入紫杉醇对照组(P < 0.05)；③Real time-PCR检测结果显示，加入10-4 mol/L紫杉醇抗酒石酸酸性磷酸酶mRNA表达明显低于未加紫杉醇的对照组(P < 0.05)，Caspase3和PARP1的蛋白表达明显高于未加紫杉醇的对照组；④结果说明，紫杉醇抑制破骨细胞的增殖及分化，并且可以促进破骨细胞的凋亡。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程
ORCID: 0000-0002-5099-3878(吴慧)

关键词: 破骨细胞, 根尖周炎, RAW264.7细胞, 紫杉醇, 细胞凋亡, 骨转移瘤, 破骨细胞凋亡, 破骨细胞增殖

Abstract:

BACKGROUND: Paclitaxel has been shown to treat bone metastases, suggesting that it has certain effect on osteolysis diseases. However, there are few studies on paclitaxel for osteolysis diseases, and the mechanism of paclitaxel regulating osteoclast formation and function remains unclear.
OBJECTIVE: To investigate the effect of paclitaxel on the proliferation and differentiation of osteoclasts in periapical periodontitis.
METHODS: RAW264.7 cells were cultured in vitro for 24 hours and RANKL was added to identify osteoclasts by real-time PCR and tartrate-resistant acid phosphatase. Different concentrations (1, 10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-5, 10-6 mol/L) of paclitaxel were used to treat osteoclasts, and the optimal concentration of osteoclasts was selected by cell counting kit-8 assay. The osteoclasts without paclitaxel were used as controls. The effect of paclitaxel on osteoclast apoptosis was detected by real-time PCR and western blot assay.
RESULTS AND CONCLUSION: The osteoclasts induced by 10-4 mol/L paclitaxel showed the weakest proliferation ability (P < 0.05), suggesting that 10-4 mol/L was the optimal concentration. After cultured by 10-4 mol/L paclitaxel for 0, 24 and 48 hours, the proliferation of osteoclasts was significantly lower than that in the control group (P < 0.05). The absorbance value of tartrate-resistant acid phosphatase of the osteoclasts cultured by 10-4 mol/L paclitaxel was significantly lower than that in the control group (P < 0.05). Real-time PCR results revealed that mRNA expression level of tartrate-resistant acid phosphatase of the osteoclasts cultured by 10-4 mol/L paclitaxel was significantly lower than that in the control group (P < 0.05). The protein expression levels of Caspase3 and PARP1 of the osteoclasts cultured by 10-4 mol/L paclitaxel were significantly higher than those in the control group. In summary, paclitaxel can inhibit the proliferation and differentiation of osteoclasts, and activate apoptosis of osteoclasts.

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Key words: Periapical Periodontitis, Osteoclasts, Taxoids, Tissue Engineering

中图分类号:

R446

吴慧, 姜龙, 李晓杰, 季秋实, 许诺. 紫杉醇对根尖周炎破骨细胞增殖及分化的影响[J]. 中国组织工程研究, 2019, 23(11): 1647-1651.

Wu Hui, Jiang Long, Li Xiaojie, Ji Qiushi, Xu Nuo. Effect of paclitaxel on proliferation and differentiation of osteoclasts in periapical periodontitis [J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2019, 23(11): 1647-1651.

图/表（结果） 5

2.1 破骨细胞诱导鉴定

2.1.1 抗酒石酸酸性磷酸酶染色未诱导的RAW264.7细胞呈类圆形，多为单核；诱导5 d可见有伪足伸长，多核巨噬细胞数目增多，细胞质内空泡增多，细胞形态多样，呈不规则形。抗酒石酸酸性磷酸酶结果显示加入RANKL诱导液5 d后，RAW264.7诱导成功，见图1A。

2.1.2 Real time-PCR检测抗酒石酸酸性磷酸酶基因表达结果显示破骨细胞中抗酒石酸酸性磷酸酶的mRNA水平诱导5 d组大于诱导0 d组(P < 0.05)，差异有显著性意义。结果显示加入RANKL诱导液5 d后，RAW264.7诱导成功，见图1B。

2.2 筛选紫杉醇作用于破骨细胞的最佳浓度 CCK8实验检测加入不同浓度紫杉醇(1，10^-1，10^-2，10^-3，10^-4，10^-5，10^-6mol/L)后破骨细胞增殖情况。结果显示，在紫杉醇 10^-4mol/L时，破骨细胞增殖能力开始降低(P < 0.05)， 10^-5mol/L紫杉醇对RAW264.7细胞具有细胞毒性，因此10^-4mol/L紫杉醇为作用于RAW264.7细胞的最佳浓度，见图2。

2.3 紫杉醇抑制破骨细胞的增殖及分化能力结果显示加，入10^-4mol/L紫杉醇的破骨细胞在0，24和48 h的增殖情况均显著低于0 mol/L紫杉醇组(P < 0.05)。表明紫杉醇可以抑制破骨细胞的增殖能力，见图3A。加入10^-4mol/L紫杉醇的破骨细胞在0，24和48 h抗酒石酸酸性磷酸酶的A值增殖情况均显著低于未加入紫杉醇组(P < 0.05)。表明紫杉醇可以抑制破骨细胞的分化能力，见图3B及表1，2。

2.4 紫杉醇对破骨细胞凋亡的影响 Real time-PCR检测结果显示，加入10^-4 mol/L紫杉醇的破骨细胞中破骨细胞标志性因子抗酒石酸酸性磷酸酶的mRNA表达明显低于未加紫杉醇的对照组(P < 0.05)，说明紫杉醇可以抑制破骨细胞的骨破坏能力，见图4A；Western-blot检测结果显示，加入10^-4 mol/L紫杉醇的破骨细胞中细胞凋亡标志因子Caspase3和PARP1的蛋白表达明显高于未加紫杉醇的对照组，说明紫杉醇可以促进破骨细胞的凋亡，见图4B。

参考文献

[1] Hosokawa Y, Hosokawa I, Ozaki K, et al. IL-27 Modulates Chemokine Production in TNF-α -Stimulated Human Oral Epithelial Cells. Cell Physiol Biochem. 2017;43(3):1198-1206.

[2] Hosokawa Y, Hosokawa I, Shindo S, et al. IL-4 Modulates CCL11 and CCL20 Productions from IL-1β-Stimulated Human Periodontal Ligament Cells. Cell Physiol Biochem. 2016;38(1): 153-159.

[3] Imai H, Fujita T, Kajiya M,et al. Mobilization of TLR4 Into Lipid Rafts by AggregatibacterActinomycetemcomitansin Gingival Epithelial Cells. Cell Physiol Biochem. 2016;39(5):1777-1786.

[4] Hans S, Mali AM. Estimation and comparison of osteopontin levels in plasma in subjects with healthy periodontium and generalized chronic periodontitis and its assessment after scaling and root planing. J Indian Soc Periodontol. 2012;16(3): 354-357.

[5] Rittling SR, Zetterberg C, Yagiz K, et al. Protective role of osteopontin in endodontic infection. Immunology. 2010;129(1): 105-114.

[6] Salinas-Muñoz M, Garrido-Flores M, Baeza M, et al. Bone resorptive activity in symptomatic and asymptomatic apical lesions of endodontic origin. Clin Oral Investig. 2017;21(8): 2613-2618.

[7] Persoon IF, Özok AR. Definitions and Epidemiology of Endodontic Infections. Current Oral Health Reports 2017; 4:278-285.

[8] Azuma MM, Samuel RO, Gomes-Filho JE, et al. The role of IL-6 on apical periodontitis: a systematic review. Int Endod J. 2014;47(7):615-621.

[9] Kalatzis-Sousa NG, Spin-Neto R, Wenzel A, et al. Use of micro-computed tomography for the assessment of periapical lesions in small rodents: a systematic review. Int Endod J. 2017;50(4):352-366..

[10] Larsen T, Fiehn N. Dental biofilm infections - an update. APMIS. 2017;125(4):376-384.

[11] Lu S, Zhang J, Zhou Z, et al. Synergistic inhibitory activity of zoledronic acid and paclitaxel on bone metastasis in nude mice. Oncol Rep. 2008;20(3):581-587.

[12] Ang ES, Pavlos NJ, Chim SM, et al. Paclitaxel inhibits osteoclast formation and bone resorption via influencing mitotic cell cycle arrest and RANKL-induced activation of NF-κB and ERK. J Cell Biochem. 2012;113(3):946-955.

[13] Zheng X, Li Z, Chen L, et al. Self-Assembly of Porphyrin– Paclitaxel Conjugates Into Nanomedicines:Enhanced Cytotoxicity due to Endosomal Escape. Chem Asian J. 2016; 11(12):1780-1784

[14] Kundranda M, Niu J. Albumin-bound paclitaxel in solid tumors: clinical development and future directions. Drug Des Devel Ther. 2015;9:3767-3777.

[15] Drobecq H, Boll E, Sénéchal M,et al. A Central Cysteine Residue Is Essential for the Thermal Stability and Function of SUMO-1 Protein and SUMO-1 Peptide–Protein Conjugates. Bioconjug Chem. 2016;27(6):1540-1546.

[16] Huang Y, Liang W, Yang Y, et al. Phase I/II dose-finding study of nanoparticle albumin-bound paclitaxel (nab®-Paclitaxel) plus Cisplatin as Treatment for Metastatic Nasopharyngeal Carcinoma. BMC Cancer. 2016;16:464.

[17] Hurria A, Blanchard MS, Synold TW, et al. Age-Related Changes in Nanoparticle Albumin-Bound Paclitaxel Pharmacokinetics and Pharmacodynamics: Influence of Chronological Versus Functional Age. The Oncologist 2015; 20:37-44.

[18] Kendra KL, Plummer R, Salgia R, et al. A Multicenter Phase I Study of Pazopanib in Combination with Paclitaxel in First-Line Treatment of Patients with Advanced Solid Tumors. Mol Cancer Ther. 2015;14(2):461-469.

[19] Oudin MJ, Barbier L, Schäfer C,et al. MENA Confers Resistance to Paclitaxel in Triple-Negative Breast Cancer. Mol Cancer Ther. 2017;16(1):143-155.

[20] Rezazadeh M, Emami J, Hasanzadeh F, et al. In vivo pharmacokinetics, biodistribution and anti-tumor effect of paclitaxel-loaded targeted chitosan-based polymeric micelle. Drug Deliv. 2016;23(5):1707-1717.

[21] Rugo HS, Barry WT, Moreno-Aspitia A,et al. Randomized Phase III Trial of Paclitaxel Once Per Week Compared With Nanoparticle Albumin-Bound Nab-Paclitaxel Once Per Week or Ixabepilone With Bevacizumab As First-Line Chemotherapy for Locally Recurrent or Metastatic Breast Cancer: CALGB 40502/NCCTG N063H (Alliance). J Clin Oncol. 2015;33(21):2361-2369.

[22] Tamura K, Inoue K, Masuda N, et al. Randomized phase II study of nab-paclitaxel as first-line chemotherapy in patients with HER2-negative metastatic breast cancer. Cancer Sci. 2017;108(5):987-994.

[23] Villaruz LC, Socinski MA. Is there a role of nab-paclitaxel in the treatment of advanced non-small cell lung cancer? The data suggest yes. Eur J Cancer. 2016;56:162-171.

[24] Yang M, Yu T, Wang Y, et al. Vaginal Delivery of Paclitaxel via Nanoparticles with Non-Mucoadhesive Surfaces Suppresses Cervical Tumor Growth. Adv Healthc Mater. 2014;3(7): 1044-1052.

[25] Sanchez-Torres A, Sanchez-Garces M, Gay-Escoda C. Materials and prognostic factors of bone regeneration in periapical surgery: A systematic review. Med Oral Patol Oral Cir Bucal. 2014;19(4):e419-25.

[26] Qu C, Meng H, Han J. Implant periapical lesion - a review and a case report with histological evaluation. Clin Oral Implants Res. 2014;25(9):1099-1104.

[27] Petersson A, Axelsson S, Davidson T,et al. Radiological diagnosis of periapical bone tissue lesions in endodontics: a systematic review. Int Endod J. 2012;45(9):783-801.

[28] Zoellner H. Dental Infection and Vascular Disease. Semin Thromb Hemost. 2011;37(3):181-192.

[29] Maeda H, Wada N, Nakamuta H, et al. Human periapical granulation tissue contains osteogenic cells. Cell Tissue Res. 2004;315(2):203-208.

[30] Yilmaz E, Watkins SC, Gold MS. Paclitaxel-induced increase in mitochondrial volume mediates dysregulation of intracellular Ca2+ in putative nociceptive glabrous skin neurons from the rat. Cell Calcium. 2017;62:16-28.

[31] Yuan Y, Zhang Y, Shi L, et al. Clinical Research on Albumin-Bound Paclitaxel-Based Chemotherapy for Advanced Esophageal Cancer. Asian Pac J Cancer Prev. 2015;16(12):4993-4996.

[32] Zhang H, Li Y, de Carvalho-Barbosa M, et al. Dorsal Root Ganglion Infiltration by Macrophages Contributes to Paclitaxel Chemotherapy-Induced Peripheral Neuropathy. J Pain. 2016; 17(7):775-786.

引言

材料方法

1.1 设计细胞学实验。

1.2 时间及地点于2017年3月至2018年5月在海南医学院第一附属医院完成。

1.3 材料 SYBR ® Premix ExTaqMⅡ(TaKaRa)；紫杉醇(上海生工)；胎牛血清(Gibco)；ALP试剂盒(碧云天)；抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)检测试剂盒(北京雷根生物技术)；抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒(Sigma)；RAW264.7细胞(上海斯信生物科技有限公司)。

1.4 实验方法

1.4.1 细胞培养 RAW264.7细胞以1×10⁵/孔密度接种在T25培养瓶中，选择DMEM培养基，体积分数10%胎牛血清5 mL培养细胞，定期更换培养液。

1.4.2 细胞诱导 RAW264.7以5×10⁵/孔密度接种于六孔板内，24 h后换100 mg/L质量浓度的RANKL诱导液，每2 d换1次诱导液，每日用倒置相差显微镜观察细胞形态。通过Real-time PCR及抗酒石酸酸性磷酸酶鉴定破骨细胞诱导成功。

1.4.3 CCK8细胞增殖试验 CCK8检测不同浓度(1，10^-1，10^-2，10^-3，10^-4，10^-5，10^-6mol/L)的紫杉醇作用于破骨细胞。细胞以2×10³/孔接种于96孔板，参照CCK8试剂盒使用说明进行操作，酶标仪测定吸光度值，筛选紫杉醇作用于破骨细胞最佳浓度。取紫杉醇最佳浓度作用于破骨细胞0，24和48 h，以0 mol/L紫杉醇为对照组，CCK8检测破骨细胞的增殖情况。

1.4.4 抗酒石酸酸性磷酸酶染色六孔板弃掉培养液，PBS 1 mL/孔清洗，37 ℃条件下40 g/L多聚甲醛1 mL/孔置于孵箱内25 min，PBS 1 mL/孔清洗，抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒配液2 mL/孔于37 ℃孵箱1 h。DDW清洗3次，500 μL/孔苏木复染2 min，PBS 1 mL/孔清洗，37 ℃孵箱中1 h(避光)；自然风干后镜下观察。参照抗酒石酸酸性磷酸酶试剂盒使用说明进行操作。

1.4.5 抗酒石酸酸性磷酸酶检测取>1×10⁶的细胞数量，PBS匀浆，离心取上清，-20 ℃冻存。直接加40 μL待测样品。轻轻混匀，37 ℃孵育30 min。采用0 mol/L及10^-4 mol/L紫杉醇分别作用于破骨细胞0，24和48 h后，用酶标仪测吸光值，通过破骨细胞标志性因子抗酒石酸酸性磷酸酶检测破骨细胞的分化情况。

1.4.6 Western blot检测细胞蛋白质提取，静置1 h；配制反应液。对蛋白进行定量分析；HRP-ECL发光法检测紫杉醇最佳浓度(10^-4 mol/L)作用于破骨细胞后破骨细胞凋亡标志因子Caspase3和PARP1的蛋白水平，以0 mol/L紫杉醇为对照组。

1.4.7 Real time-PCR检测加Trizol提取并纯化RNA，反转录合成cDNA。抗酒石酸酸性磷酸酶F：3-GGG TCA CTG CCT ACC TGT GT-5，抗酒石酸酸性磷酸酶R：3-TCAT TTC TTT GGG GCT TAT CTC-5；GAPDH F：3- AAA TGG TGA AGG TCG GTG TG-5，GAPDH R：3-TGA AGG GGT CGT TGA TGG-5。

检测紫杉醇最佳浓度(10^-4mol/L)作用破骨细胞后破骨细胞标志性因子抗酒石酸酸性磷酸酶mRNA表达，以 0 mol/L紫杉醇为对照组。

1.5 主要观察指标 ①破骨细胞的形态及抗酒石酸酸性磷酸酶染色情况；②筛选紫杉醇作用于破骨细胞最佳浓度；③紫杉醇作用于破骨细胞后的增殖、分化及凋亡结果。

1.6 统计学分析采用SPSS 13中单因素方差分析，P < 0.05为差异有显著性意义。

中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程

讨论

根尖周炎是一种以根尖部骨组织破坏为主要临床症状之一的炎症反应疾病。根尖周炎中的炎症灶内破骨细胞大量增殖，成骨细胞减少，导致骨动态平衡失调，根尖部骨吸收^[25-28]，由于其骨组织的丧失，会导致患牙的最终丧失。病理性骨破坏(骨质溶解)是根尖周炎的标志病理症状^[4^，^29]。但是临床上仍没有一个有效的药物治疗根尖周炎出现的骨组织缺损。目前临床国内外都在需求一种治疗根尖周炎骨缺损的有效药物。

紫杉醇经常用于治疗恶性肿瘤，研究表明紫杉醇对骨病变有益^[30-31]，然而，紫杉醇调节破骨细胞形成和功能的机制仍然不明确。所以为了探求紫杉醇治疗根尖周炎的可行性，采用不同浓度紫杉醇作用于破骨细胞，筛选其作用于破骨细胞的最佳浓度。之后将10^-4mol/L紫杉醇作用于破骨细胞0, 24和48 h后检测破骨细胞的增殖及分化情况，结果显示，紫杉醇可以抑制破骨细胞的增殖及分化能力。为了进一步研究紫杉醇对破骨细胞的抑制作用是否是通过凋亡途径实现的，作者又选取了10^-4mol/L紫杉醇进行Western-blot检测。结果显示加入10^-4mol/L紫杉醇的破骨细胞中细胞凋亡标志因子Caspase3和PARP1的蛋白水平明显高于对照组，结果表明紫杉醇可以促进破骨细胞的凋亡。其原因可能为紫杉醇可以导致细胞的G2/M阻滞和OCL微核化，导致破骨细胞有丝分裂停滞，促使破骨细胞凋亡^[7^，^32]。同时，通过Real-time PCR实验发现紫杉醇可以抑制破骨细胞标志因子抗酒石酸酸性磷酸酶的表达，说明紫杉醇可以抑制破骨细胞发挥骨破坏的功能。学者研究表明紫杉醇在小鼠颅骨模型中降低了脂多糖诱导的骨溶解。还有学者指出紫杉醇诱导破骨细胞前体细胞的有丝分裂停滞。此外，荧光素酶报道基因测定和蛋白质印迹分析表明，紫杉醇可以抑制破骨细胞RANKL的激活，进入阻止破骨细胞的形成。

总的来说，紫杉醇可以抑制破骨细胞形成和功能。研究表明紫杉醇直接调节破骨细胞的形成和分化，但是紫杉醇对破骨细胞形成及分化的抑制作用的确切机制还有待进一步深入研究。

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Effect of paclitaxel on proliferation and differentiation of osteoclasts in periapical periodontitis

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[1]	耿秋东, 葛海雅, 王和鸣, 李楠. 基于网络药理学探讨龟鹿二仙胶治疗骨关节炎的作用及机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(8): 1229-1236.
[2]	李时斌, 赖渝, 周毅, 廖建钊, 章晓云, 张璇. 激素性股骨头坏死发病机制及相关信号通路的靶点效应[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(6): 935-941.
[3]	张咪, 吴赛璇, 董明, 陆颖, 牛卫东. 根尖周炎模型小鼠白细胞介素24的表达[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(5): 679-684.
[4]	徐银琴, 史红美, 王光义. 通痹方热敷联合针刺治疗对退变椎间盘细胞凋亡相关基因Caspase-3、Bcl-2 mRNA的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(5): 713-718.
[5]	张雯雯, 金颂峰, 赵国梁, 宮丽鸿. 复方中药稳斑汤减少同型半胱氨酸诱导大鼠心肌微血管内皮细胞凋亡的作用机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(5): 723-728.
[6]	刘青, 万碧江. 针刀治疗胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织Bcl-2/Bax的表达[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(5): 729-734.
[7]	魏聪聪, 姚孟轩, 杨梦, 李会杰. 人工关节假体周围骨溶解的机制和治疗策略[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(27): 4401-4407.
[8]	杨彩会, 刘启成, 董明, 王丽娜, 左美娜, 陆颖, 牛卫东. 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶促进慢性根尖周炎模型小鼠的骨破坏[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(23): 3654-3659.
[9]	左振魁, 韩佳瑞, 计树灵, 贺璐璐. 银杏酮酯预处理减轻辐射所致模型小鼠的急性肠损伤[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(23): 3666-3671.
[10]	张亮, 马晓燕, 王佳虹. 肾衰饮调控慢性肾功能衰竭大鼠肾脏细胞凋亡的机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(23): 3672-3677.
[11]	霍花, 程余婷, 周倩, 齐昱晗, 伍超, 石前会, 杨童景, 廖健, 洪伟. 种植体表面药物涂层对骨结合的影响[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(22): 3558-3564.
[12]	蒋昇源, 李丹, 姜建浩, 杨上游, 杨淑野. 假体无菌性松动过程中Co2+对成骨前体细胞的生物学反应[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(21): 3292-3299.
[13]	李啸群, 徐凯航, 纪方. 补骨脂异黄酮抑制破骨细胞分化缓解小鼠去卵巢骨质疏松[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(2): 186-190.
[14]	严秀蕊, 陶金, 梁雪云. 人胎盘间充质干细胞来源外泌体保护氧化应激损伤肺上皮细胞的机制[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(19): 2994-2999.
[15]	辛鹏飞, 柯梦楠 , 张海涛, 乌日莎娜, 李子祺, 庄至坤, 魏秋实, 何伟. 活血化瘀中药治疗股骨头坏死共同作用机制的网络药理学数据[J]. 中国组织工程研究, 2021, 25(17): 2727-2733.